|
|||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||
| 摘要 目的 检测内皮型一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶在绒毛膜癌组织中的表达,探讨一氧化氮合酶基因在绒毛膜癌发生、发展过程中的作用。方法 用免疫组化SP法，对24例绒毛膜癌和22例早孕正常绒毛组织中内皮型一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶进行检测。结果 在早孕正常绒毛组织中，内皮型一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶表达阳性率分别为18.18%、4.55%,而在绒毛膜癌组织中，内皮型一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶表达阳性率分别为50%、37.50%,绒毛膜癌组织中内皮型一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶的表达阳性率,与其各自的对照组相比均有显著差异(P＜0.05)。结论 一氧化氮合酶可能在绒毛膜癌的发生、发展过程中起着重要的作用。 关键词 绒毛膜癌 一氧化氮合酶 一氧化氮 免疫组织化学 Expression of nitric oxide synthase in the tissues of choriocarcinoma and its significance.CHEN Fangla-n,GUO Bilian,LI Shumei，SUN Feng.(Department of Obstetrics and Gynecology，Dingxi City Hospital，Gansu，743000 China) Abstract Objective To examine the expression of endothelial nitric oxide synthase(eNOS)and indu-cible nitric oxide synthase(iNOS) in choriocarcinoma and to detect the role of nitric oxide synthase(NOS) that plays in the oncogenesis and development of choriocarcinoma.Methods Immunohistochemical SP method was used to detect the eNOS and iNOS gene expression in the tissues of 24 cases of choriocarci-noma and 22 cases of normal chorion of early pregnancy.Results The positive rate of eNOS and iNOS expression was respectively 18.18% and 4.55% in the chorion of early pregnancy，The positive rate of e-NOS and iNOS expression was respectively 50% and 37.50% in the choriocarcinoma.The positive rate of eNOS expression was significantly different between choriocarcinoma groups and its control groups(P＜0.05)，so was the positive rate of iNOS expression.Conclusions Nitric oxide synthase might play an im-portant role in the oncogenesis and development of choriocarcinoma. Key words Choriocarcinoma；Nitric oxide synthase(NOS)；Nitric oxide(NO)；Immunohistochemi-stry 一氧化氮合酶是催化一氧化氮生物合成的酶,是内源性一氧化氮合成的惟一限速酶。研究表明，一氧化氮与心血管系统、胃肠系统、免疫系统、肿瘤、创伤、感染等许多疾病都有密切关系，是近年来生命科学领域的研究热点之一[1]。内皮型一氧化氮合酶与诱导型一氧化氮合酶是一氧化氮合酶的两种同工酶，它们在许多肿瘤中均有表达，参与了肿瘤的发生、发展过程，但有关它们在绒毛膜癌中表达的研究尚未见报道。本研究采用免疫组化SP法，检测24例绒毛膜癌组织中eNOS蛋白和iNOS蛋白的表达，分析eNOS基因、iNOS基因在绒毛膜癌发生、发展中的作用。 1 资料与方法 1.1 研究对象 选取甘肃省定西市人民医院1993～今年间因绒毛膜癌而手术切除的子宫标本24例，近期妊娠6～8周的人流术后绒毛组织22例作为对照，共46例石蜡包埋标本作为研究对象。24例绒毛膜癌均为妊娠性绒毛膜癌，术前未接受放疗、化疗或其它特殊治疗。 1.2 实验方法 标本均用10%福尔马林固定，常规石蜡包埋。5μm厚连续切片3张，2张用于免疫组化，1张行HE染色。采用免疫组化SP法，检测24例绒毛膜癌组织中eNOS蛋白和iNOS蛋白的表达。兔抗人eNOS多克隆抗体和兔抗人iNOS多克隆抗体均为BOSTER BIOTECHNOLOGY COM.LTD产品。DAB显色试剂盒以及SP试剂盒均为福州迈新生物技术开发公司产品。具体实验步骤按试剂盒说明进行。 1.3 结果判定 eNOS蛋白和iNOS蛋白免疫组化染色,细胞浆内出现均匀一致或细颗粒状的棕黄色染色为阳性表达。随机选取10个高倍视野，根据阳性细胞数占细胞总数的百分比及染色强度分为4个等级:无阳性细胞或阳性细胞极少，无色者为阴性(-)；阳性细胞数＜25%，呈淡黄色者为弱阳性(+)；阳性细胞数为25%～50%，呈黄色者为中等阳性(++)；阳性细胞数为＞50%，呈棕黄色者为强阳性(+++)。双盲法阅片。 1.4 统计学处理 采用χ2检验、四格表确切概率法。 2 结果 2.1 eNOS在绒毛膜癌组织中的表达 eNOS蛋白表达主要位于细胞浆，呈棕黄色。22例早孕正常绒毛组织中eNOS蛋白阳性表达4例,阳性率18.18%；24例绒毛膜癌组织中eNOS蛋白阳性表达12例,阳性率50.00%(见表1)。统计学分析显示，绒毛膜癌组与对照组间eNOS蛋白阳性表达率有显著性差异(χ2=5.122727，P＜0.05)。 表1 eNOS在绒毛膜癌组织中的表达
2.2 iNOS蛋白在绒毛膜癌组织中的表达 iNOS蛋白表达也位于细胞浆，只是染色强度较弱而已。22例早孕正常绒毛组织中iNOS蛋白阳性表达1例，阳性率4.55%；24例绒毛膜癌组织中iNOS蛋白阳性表达9例，阳性率37.5%(见表2)。统计学分析显示，绒毛膜癌组与对照组间iNOS蛋白阳性表达率有显著性差异(χ2=5.517919，P＜0.05)。 |
|||||||||||||||||||||||||