乙肝及乙肝后肝硬化患者血清中自身抗体的检测-临床医学
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乙肝及乙肝后肝硬化患者血清中自身抗体的检测


  摘要  目的  探讨乙肝患者自身抗体的检出率及其在病情转归中的作用。方法  应用酶标法、间接免疫荧光法对乙肝及乙肝后肝硬化患者进行了乙肝标志物及抗核抗体的检测,用放射免疫法、速率散射比浊法分别检测研究对象的抗甲状腺球蛋白抗体与抗甲状腺微粒体抗体(TGA/TMA)、类风湿因子(RF),并以48例正常体检者为对照。结果  208例乙肝患者血清中各种自身抗体阳性病例共62例,阳性率为29.8%;64例乙肝后肝硬化患者血清中各种自身抗体阳性病例共34例,阳性率为53.1%,均明显高于对照组(P<0.01)。结论  乙肝及乙肝后肝硬化患者血清中自身抗体检测有较高的检出率,乙肝后肝硬化的发生机制可能与病毒感染后引起自身免疫紊乱,产生自身抗体,从而加重对肝脏的损伤有关。
  关键词  自身抗体  乙型肝炎
 
The detection of  autoantibodies  in  serum of patient with hepatitis B and hepatocirrhosis after hepatitis B  FAN A-ijun,LU Lingyun,PENG Minfeng (Hangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine  310000  China)
 
  Abstract  Objective  To explore the positive rate of autoantibodies in serum of patient with hepatitis B and its function in the progress of the disease.Methods  The  ANA and  HBVM in patient with hepatitis B were mesured by using enzyme-linked immunosobent assay (ELISA) and indirect immunofluoresence ,thyroglobulin antibody and thyroid microsome antibody(TGA/TMA),rheumatoid factor(RF) were mesured by using radioimmunoassay and ne-phelometry of velocity,comparing with 48 normal controls.Results  The positive rates of autoantibodies are signif-icantly higher in patients ering from hepatitis B and in patients with hepatocirrhosis after hepatitis B than those in normal controls(P<0.01);The positive rates of autoantibodies in patients with hepatocirrhosis after hepatitis B are higher than those with hepatitis B.Conclusion  There are a high positive rate in patients with hepatocirrhosis after hepatitis B,The mechanism of hepatocirrhosis after hepatitis B is probably related to the virus inffection ,which induce autoimmune,and  generate autoantibody.
 
  Key words  Autoantibodies;Hepatitis B
 
  乙型肝炎是我国的常见病、多发病,除了急性感染外,还可发展为慢性,甚至变为肝硬化、肝癌,危害十分严重。近年的研究显示部分肝病患者血清中可检测到多种自身抗体,因此,自身免疫在病毒性肝炎发病机制、病情发展及癌变的作用中日益受到重视。为进一步了解自身抗体在乙肝中的检出率及在病情转归中的作用,我们检测了208例乙肝及64例乙肝后肝硬化患者血清中的有关自身抗体,现报道如下。
1  材料与方法
 
1.1 材料  随机选取我院今年1月~今年1月门诊和住院乙肝患者208例,男性135例,女性73例,平均年龄33.07岁;乙肝后肝硬化64例,其中男性47例,女性17例,平均年龄48.0岁,所有病例均符合2000年《病毒性肝炎防治方案》诊断标准。正常对照64例(均经体检健康者),其中男性30例,女性38例,平均年龄32.95岁。采集空腹静脉血,分离血清后,置-20℃冰箱待测。
 
1.2 方法  抗原、抗体检测:HBV血清标志物检测采用ELISA法,试剂盒购自科华生物技术公司。抗核抗体采用间接免疫荧光法(IIF)检测,大鼠肝抗原片由本院免疫室制备,荧光抗体试剂购于德国Euroimmun公司;严格按说明书操作。类风湿因子(RF)采用速率散射比浊法(BECKMAN ARRAY360仪器)测定,试剂由BECKMAN公司提供。 抗甲状腺球蛋白抗体与抗甲状腺微粒体抗体(TGA/TMA)测定采用放免法,药盒由上海放射免疫分析技术研究所提供,操作按药盒说明书进行。
 
1.3 统计处理  应用SPSS10.0统计软件进行资料分析,各组间阳性率比较采用χ2检验。
 
2  结果
 
  70例对照组血清各种自身抗体共检测出3例阳性,占4.3%;208例乙肝患者血清中各种自身抗体阳性病例共62例,阳性率为29.8%,明显高于对照组(χ2 =19.05,P<0.01);64例乙肝后肝硬化患者血清中各种自身抗体阳性病例共34例,阳性率为53.1%,也显著高于对照组(χ2=39.92,P<0.01)。乙肝后肝硬化组与乙肝组抗体阳性率比较差异也具显著性(χ2=11.64,P<0.01)。检测结果见表1。
 
1          乙肝及乙肝后肝硬化患者自身抗体检测结果

组别

例数

阳性数(%)

RF

ANA

TGA

TMA

对照组

70

3(4.3)

0

3

0

0

乙肝组

208

62(29.8)

21

34

2

2

乙肝后肝硬化组

64

34(53.1)

20

26

4

4

3  讨论
 
  我国是慢性肝病的高发区[1],而乙型肝炎占多数,乙肝感染后肝硬化的发生机制是近年来研究的重点[2]。有文献报道慢性病毒性肝炎、 肝癌患者血清中能检测到自身抗体[3,4]。国内范列英、仲人前等报道在慢性肝病、肝癌中能检测到自身抗体及肝特异性自身抗体,且随着肝病的恶化,检出率逐渐升高[5]。因此自身免疫在病毒性肝炎病情发展及癌变中的作用受到研究者的重视。
 
  我们在乙肝及乙肝后肝硬化患者中检测出多种自身抗体,自身抗体的出现提示机体自身免疫的紊乱,其可能机制为:(1)肝炎病毒感染导致控制自身免疫的机制紊乱;(2)肝炎病毒感染诱导自身抗原修饰,从而激发自身免疫;(3)肝炎病毒抗原与机体自身抗原之间的分子模拟。
 
  抗核抗体(ANA)是能与细胞核或其组成成分反应的自身抗体,主要出现在红斑狼疮等一类自身免疫病,是诊断红斑狼疮的主要手段之一。近年来研究已证实此自身抗体也存在于部分肝炎患者的血清中,且在部分自身免疫性肝炎患者中有较高的阳性率。 我们的研究结果是AN 在乙肝及乙肝后肝硬化患者血清中检出率分别为16.3%、40.6%,肝硬化组也明显高于乙肝组。
 
  类风湿因子(RF)是抗变性IgG的自身抗体,主要出现在类风湿性关节炎患者中。我们在乙肝及乙肝后肝硬化患者血清中检出率分别为10.1%、31.2%,肝硬化组也明显高于乙肝组。TGA/TMA在乙肝及乙肝后肝硬化患者中阳性率不高,但也明显高于对照组。
 
  我们在乙肝及乙肝后肝硬化患者血清中检测出多种自身抗体,主要为ANA和RF,总检出率明显高于对照组,提示乙肝感染与自身免疫密切相关,自身抗体的出现可能加剧肝脏的病理损害,自身免疫在乙型肝炎肝细胞损伤中起重要作用。乙肝及乙肝后肝硬化病人自身抗体的检测,对探讨其自身免疫反应的发生机制及病因研究有一定的意义。
 
参考文献
 
1  李异铃,傅宝玉.辽宁药物与临床,2003,6:113-117
 
2  雷秉钧.见:叶维法,钟振义,主编.肝病免疫学.天津:天津科学技术出版社,1997.442-451
 
3  Imai H,Nakano Y,Kiyosawa K,et al.Cancer,1993,71(1):26-35
 
4  Covini G,Muhlen CA,Pacchetti S,et al.J Hepatol,1997,26(6):1255-1265
 
5  范列英,仲人前,李红梅,等.第二军医大学学报,2000,21(4):312-313
 
6  范列英,仲人前,孔宪涛,等.上海医学,2000,23(5):279-281
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